Notch信号通路抑制剂调控鼠Müller细胞来源的干细胞向神经节细胞分化的研究

• 作者: 喻一心 夏晓波 宋伟涛 张雪咏 文丹 熊思齐 蒋剑
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小神经胶质细胞 视网膜神经节细胞 干细胞 受体,Notch 动物实验
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 395-398
• 页数: 4页
• 分类号: R774
• 字数: 4346字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2014.04.015

摘要

目的 观察Notch信号通路抑制剂对鼠Müller细胞来源的视网膜干细胞的调控作用.方法 Sprague Dawley大鼠20只,鼠龄10～20 d.显微镜下分离视网膜,采用反复不完全胰蛋白酶消化法传代培养.取传代3次的细胞用于实验.Müller细胞诱导去分化,荧光显微镜下观察细胞增生状态,免疫荧光细胞化学染色,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测视网膜干细胞特异性表达产物巢蛋白(Nestin)、Ki-67的表达;5-乙炔基2'脱氧尿嘧啶核苷(Edu)染色检测细胞核阳性率.视网膜干细胞随机分为Notch信号通路γ分泌酶抑制剂(GSI)干预组(GSI组)和对照组,采用免疫荧光染色方法统计分析神经节细胞的比例变化.结果 荧光显微镜观察结果显示,去分化培养细胞增生聚集成球.免疫荧光细胞化学染色结果显示,Nestin、Ki-67表达率分别为(92.94±6.48)％、(85.96±6.04)％.细胞核Edu阳性率为(82.80±6.65)％.RT-PCR、Western blot检测结果显示,神经球中Nestin、Ki-67 mRNA、蛋白均呈高表达,纯化后的Müller细胞中无表达.GSI组、对照组神经节细胞阳性率分别为(16.98±2.87)％、(11.17±0.71)％.两组细胞阳性率比较,差异有统计学意义(t=3.210,P=0.002).结论 Notch信号通路是视网膜干细胞向神经节细胞分化过程中重要的调控基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏晓波	中南大学湘雅医院眼科	85	304	9.0	12.0
2	文丹	中南大学湘雅医院眼科	44	174	8.0	10.0
3	熊思齐	中南大学湘雅医院眼科	24	64	5.0	7.0
4	宋伟涛	中南大学湘雅医院眼科	12	52	3.0	7.0
5	蒋剑	中南大学湘雅医院眼科	22	48	4.0	5.0
6	喻一心	中南大学湘雅医院眼科	2	0	0.0	0.0
7	张雪咏	中南大学湘雅医院眼科	2	0	0.0	0.0