以STAT3为靶标的抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立和应用

• 作者: 刘祥 孟晶 张宁 杨诚 潘丽 牛国君
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: STAT3 靶点 高通量模型 ELISA
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 187-192
• 页数: 6页
• 字数: 4538字
• 语种: 中文

摘要

旨在建立稳定可靠的以转导与转录激活子（STAT3）为靶标的抗肿瘤高通量筛选模型，应用该模型筛选潜在的抗癌药物。利用基因重组、蛋白表达纯化技术，获得STAT3目的蛋白，使用酶联免疫吸附法（ELISA）进行高通量药物筛选，将筛选出的抑制剂在细胞水平上利用MTT比色法测定化合物对癌细胞增殖的影响。结果显示，成功构建表达载体pET-28a-STAT3；所建立的模型稳定可行，可用于以STAT3为靶标的抗肿瘤药物的高通量筛选；用该模型对8248个样品进行筛选，在500μmol/L药物浓度下，化合物MDC6抑制率为92%，另外，进行IC50值的测定时，分子水平上最低达到3.37μmol/L，在细胞水平上可达到15.92μmol/L。建立的高通量药物筛选模型，具有操作方便、成本低、结果稳定等特点，可用于STAT3抑制剂的大规模筛选。