重组腺相关病毒介导VEGF和BMP双基因共表达对兔早期激素性股骨头坏死的修复作用

• 作者: 党晓谦 唐一仑 张晨 时志斌 李兴华 李苗 王坤正
• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 关键词: 股骨头坏死 糖皮质激素类 依赖病毒 血管内皮生长因子类 骨形态发生蛋白质7 基因疗法
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 852-863
• 页数: 12页
• 字数: 11687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2352.2014.08.009

摘要

目的：探讨重组腺相关病毒介导VEGF和BMP双基因共表达对兔早期激素性股骨头坏死的修复作用。方法制备兔早期激素性股骨头坏死模型，经MRI筛选的成模动物随机分为rAAV-IRES-hrGFP（AAV-GFP）、rAAV-hVEGF165-IRES-hrGFP（AAV-VEGF）、rAAV-hBMP-7-IRES-hrGFP（AAV-BMP）及rAAV-hVEGF165-IRES-hBMP-7（AAV-VEGF/BMP）四组。通过髓芯减压手术分别将四种重组腺相关病毒载体直接注射入各组髓芯减压区内（25μl/侧）。注射12周后分别应用Western blot检测、HE及免疫组织化学染色、MR检查、核素骨扫描、股骨头血管墨汁灌注冰冻切片、Micro-CT及股骨头生物力学检测等方法综合评估重组腺相关病毒载体对兔早期激素性股骨头坏死的修复作用。结果兔早期激素性股骨头坏死模型成模率可达73.33%。病毒注射12周后，rAAV-hVEGF165-IRES-hBMP-7载体有效表达hVEGF165及hBMP-7基因，并产生hVEGF165及hBMP-7目的蛋白；体内表达的hVEGF165目的蛋白通过增加股骨头内新生血管数量改善血供，促进了骨坏死区组织代谢；体内表达的hBMP-7目的蛋白通过增加股骨头区骨矿物质密度，促进髓芯减压后骨生成。AAV-VEGF/BMP组重组腺相关病毒载体较AAV-VEGF组及AAV-BMP组更有效地提高了兔早期激素性股骨头坏死的修复效果。结论 hVEGF165和hBMP-7双基因共表达重组腺相关病毒载体通过增加股骨头的血供及增强股骨头骨质量，对兔早期激素性股骨头坏死具有良好的修复作用。