抗2,4-D巨大芽孢杆菌基因组文库的构建

• 作者: 徐思靓 邱丽娟 金龙国 陶波 韩潮
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗2,4-D 巨大芽孢杆菌 基因组文库 转基因大豆
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 826-829
• 分类号: Q933
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2014.06.0826

摘要

以抗2,4-D的巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium为材料,酶切基因组总DNA和载体pACYC184;回收1～4 kb范围的外源基因组DNA片段,与载体连接后,转入BL21感受态细胞中,进行蓝白斑与氯霉素抗性筛选,采用菌落PCR方法检测连接效率,并对该文库进行质量鉴定.成功构建了巨大芽孢杆菌基因组文库,得到8 900个阳性重组子,平均插入片段长度为2.5 kb,文库约覆盖了B.megaterium菌株基因组的556倍.该文库的建立为选育抗2,4-D转基因大豆的新品种奠定了基础.