摘要:
背景 近年来,干眼的发生率逐年增加,其病因及眼部表现多样,研究认为女性绝经是干眼发病的高危因素之一.目前关于炎性因子参与干眼发病的病理机制越来越受到重视,探讨炎性因子,如白细胞介素(IL)和肿瘤坏死因子(TNF),与性激素改变的关系对干眼病因学和病理机制的探讨具有重要意义.目的 建立去卵巢大鼠模型,观察性激素水平变化对结膜炎性因子表达的影响. 方法 将健康成年雌性SD大鼠20只按随机数字表法随机分为卵巢摘除组和伪手术组.卵巢摘除组大鼠行双侧卵巢摘除术,伪手术组大鼠不摘除卵巢,其他手术步骤同卵巢摘除组.两组大鼠均于术前及术后l、2、3个月行Schirmer试验Ⅰ(SⅠt)和角膜荧光素钠染色检查,评估眼表干眼症状.于术后3个月时大鼠行心脏穿刺采血,用放射免疫分析法检测两组大鼠血清雌二醇、睾酮的质量浓度.以过量麻醉法处死大鼠,收集大鼠结膜组织行苏木精-伊红染色,观察大鼠结膜上皮细胞的形态学变化,分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测两组大鼠结膜组织中IL-17A、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白的表达.结果 卵巢摘除组和伪手术组大鼠术后3个月时血清雌二醇质量浓度分别为(23.53±1.65) pg/L和(47.89±1.05) pg/L;血清睾酮质量浓度分别为(1.84±0.09) ng/L和(2.47±0.12) ng/L,卵巢摘除组大鼠血清雌二醇和睾酮质量浓度均明显低于伪手术组,差异均有统计学意义(t=-35.37、-12.13,P<0.01).两组大鼠手术前及术后l、2、3个月SⅠt结果差异均无统计学意义(F分组=0.38,P=0.55;F时间=0.13,P=0.72;F交互作用=0.39,P=0.76);两组大鼠手术前后各时间点均未发现角膜荧光素钠着染.卵巢摘除组大鼠结膜上皮细胞较伪手术组层数增多,细胞排列紊乱.免疫组织化学法和Western blot法检测均显示,卵巢摘除组大鼠结膜组织中IL-17A表达量(A值)明显高于伪手术组,差异均有统计学意义(t=8.22、19.41,P<0.01);卵巢摘除组大鼠结膜组织中IL-1β、IL-6和TNF-α因子的表达量(A值)均明显高于伪手术组,差异均有统计学意义(免疫组织化学法:IL-1β:t=16.43,P<0.01;IL-6:t=13.44,P<0.01;TNF-α:t=16.26,P<0.01;Western blot法:IL-1β:t=12.63,P<0.01; IL-6:t=17.17,P<0.01; TNF-α:t=15.19,P<0.01).结论 雌性大鼠去卵巢后性激素水平明显降低,结膜组织中IL-17A、IL-1β、IL-6和TNF-α等炎性因子的表达均增加,但未发现明显的眼表损害.