慢病毒介导shRNA干扰前列腺癌PC3细胞Keap1基因表达的研究

• 作者: 刘晓平 吴欣俐 王天珩
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: Keap1 shRNA 慢病毒 PC3细胞
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 861-865
• 分类号: R73
• 语种: 中文

摘要

目的:针对Keap1构建shRNA慢病毒干扰载体,并评价慢病毒介导的RNA干扰在人前列腺癌细胞PC3中的基因沉默效应.方法:利用生物信息学方法设计针对Keap1的RNAi寡聚核苷酸序列;采用慢病毒载体构建Keap1的shRNA载体,利用大肠杆菌进行重组表达,利用293T细胞包装得到重组腺病毒;依据绿色荧光蛋白(GFP)示踪,逐孔稀释法确定转染效率及滴度;以实时荧光定量法比较各靶序列的基因干扰效果.结果:筛选了所构建的4个Keap1靶向序列,以慢病毒载体构建完成对应Keap1的shRNA质粒.通过瞬时转染筛选得到效率最佳(干扰效率达到80％)的靶序列和工作条件.结论:本研究成功构建并筛选了针对Keap1的shRNA慢病毒载体,有效抑制PC3细胞中Keap1的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓平	皖南医学院药学院	41	216	9.0	13.0
2	吴欣俐	皖南医学院药学院	3	7	2.0	2.0
3	王天珩	皖南医学院药学院	2	2	1.0	1.0