禽腺联病毒VP基因在昆虫细胞中的表达

• 作者: 吴双 左伟勇 朱善元 洪伟鸣 王安平 王永娟
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽腺联病毒 VP基因 昆虫细胞 表达
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 162-166
• 页数: 5页
• 分类号: S476+.13
• 字数: 3333字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2014.01.028

摘要

为同时在昆虫细胞中按照合适比例表达禽腺联病毒的3个结构蛋白质,首先根据禽腺联病毒VP基因序列设计引物,扩增VP基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转移载体pFastBac-VP,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒rBacmid-VP,在脂质体的介导下转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBac-VP.SDS-PAGE结果分析表明,3个结构蛋白质VP1、VP2和VP3均获得了表达,分子量正确,且比例为1:1:10.Western blot结果显示,表达的重组蛋白质能够与VP3多抗反应.以上结果说明禽腺联病毒的3个结构蛋白质均在昆虫细胞中获得了成功表达.