环介导等温扩增方法检测食品中单核细胞增生李斯特菌的效果和评价

• 作者: 张海予 张蕾 曾静 程晋霞 马丹
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 关键词: 核酸扩增技术 聚合酶链反应 食品 单核细胞增生李斯特菌 环介导等温扩增
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 213-217
• 页数: 5页
• 字数: 4648字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2014.03.012

摘要

目的 将环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法应用于食品中单核细胞增生李斯特菌的检验,并在检测方法特异性、灵敏度等方面与实时荧光PCR和传统方法进行比较.方法 针对单核细胞增生李斯特菌hly溶血素基因设计LAMP引物,应用LAMP方法对88株单核细胞增生李斯特菌、1株单核细胞增生李斯特菌参考菌株ATCC 15313、33株非目标菌进行检测；并进行食品基质添加实验及对样品进行检测,同时应用实时荧光PCR方法和ISO 11290-1方法进行平行检测.对3种检测方法的特异性、灵敏度、检测低限及实际样品检验的结果进行比较.结果 LAMP和荧光PCR对89株单核细胞增生李斯特菌的检验结果均为阳性(100％,89/89),33株非目标菌的检测结果均为阴性(100％,33/33).LAMP方法的检测灵敏度为2×102 CFU/ml,与实时荧光PCR方法(2×102 CFU/ml)相同,且优于ISO 11290-1方法(2×104 CFU/ml).食品基质添加实验结果显示,3种检测方法的检测低限均为3 CFU/25 g样品.实际食品样品检测结果显示,3种方法单核细胞增生李斯特菌的检出率均为4％(2/45).结论 本研究建立的单核细胞增生李斯特菌LAMP检测方法具有良好的特异性,检测灵敏度与实时荧光PCR相当,适用于单核细胞增生李斯特菌的快速筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张蕾	100026 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心微生物实验室	10	47	4.0	6.0
3	张海予		13	64	5.0	7.0
4	程晋霞	100026 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心微生物实验室	8	37	4.0	5.0