大脑皮层神经元原代培养方法的改良及一种体外缺氧缺糖简易模型的建立

• 作者: 于沛 周新华 张在军
• 来源期刊: 中南药学
• 学科: 医学
• 关键词: SD胎鼠 神经元 原代培养 TrypLE OGD MTT LDH
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 439-442
• 页数: 4页
• 分类号: R965.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7539/j.issn.1672-2981.2014.05.014

摘要

目的 改进SD胎鼠大脑皮层神经元体外原代培养方法及其一种缺氧缺糖(OGD)简易模型建立.方法 用温和的TrypLE胰酶消化得到单个皮层神经细胞,用含有B27的Neurobasol培养基进行培养.培养7d后,将其培养液换成无糖DMEM培养液,放入缺氧装置中分别培养4、5及6h,利用MTT法检测细胞存活率,并用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养液中LDH的释放量.结果 分离和培养的神经元生长状态良好,免疫荧光方法证明该方法培养的大脑皮层神经元纯度可达到(93.2±1.3)％,能够达到实验研究的要求.细胞OGD4、5及6h后,细胞存活率分别为(52.7±1.3)％、(26.5±3.3)％及(20.8±1.1)％:LDH的释放量分别为(52.9±4.8)％、(89.3±1.3)％及(93.2±11)％.结论 改良后的培养方法能够稳定地获得高纯度的SD胎鼠大脑皮层神经元,用厌氧发生装置替代三气培养箱建立了一种OGD简易模型,同时选择OGD4h作为缺氧缺糖模型最佳时间点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于沛		33	84	5.0	8.0
2	张在军		19	205	9.0	14.0
3	周新华		3	7	1.0	2.0