圆果黄麻纤维素合成酶基因CcCesA1的克隆及利用反义载体转化拟南芥

• 作者: 张立武 张雨佳 张高阳 徐建堂 方平平 林荔辉 牛小平 祁建民 陶爱芬
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 圆果黄麻(Corchorus capsularis L.) 纤维素合成酶 RACE Southern杂交 拟南芥
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 816-822
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.00816

摘要

以圆果黄麻(Corchorus capsularis L.)“179”茎部韧皮为材料,利用同源克隆和RACE技术,克隆黄麻纤维素合成酶基因CcCesA1 5'端500 bp序列外的全部cDNA.其序列长度为2529 bp,编码627氨基酸残基,经Blast基因比对和蛋白质结构分析,确定是黄麻纤维素合成酶基因.半定量RT-PCR分析表明,CcCesA1在植株不同部位表达量具组织差异性,依次为茎部韧皮＞根＞叶＞顶芽＞麻骨.利用CcCesA1基因部分cDNA序列和3'UTR区,构建黄麻CcCesA1基因反义载体,用测序验证的阳性质粒转化模式植物拟南芥.Southern杂交结果表明,外源基因以单拷贝方式整合进入基因组,转基因拟南芥生长严重受阻,植株变得矮小且茎部易弯曲倒伏,角果数量变少,长度变短,纤维素含量有不同程度的降低,本研究结果表明,所克隆的黄麻CcCesA1基因除了参与植物其他生理代谢过程外,还参与纤维素的生物合成.