氯化钴作用下大鼠肝癌细胞株RH35的HI F-1α与VEGF表达及侵袭性影响的研究

• 作者: 单鸿 林曲 柏明军 毛军杰 王龙 胡晓俊 陈俊伟 黄明声
• 来源期刊: 新医学
• 关键词: 肝肿瘤 缺氧 缺氧诱导因子-1α 血管内皮细胞生长因子 肿瘤侵袭
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 790-795
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/g.issn.0253-9802.2014.12.003

摘要

目的：研究不同浓度的氯化钴（CoCl2）对大鼠肝癌细胞株（RH35）的缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响，及对RH35增殖及侵袭能力影响。方法利用不同浓度的（0、50、100、150、200μmol／L）CoCl2建立RH35缺氧模型。通过Cell Counting Kit-8（CCK-8）检测CoCl2对RH35的体外生长增殖活性的影响。定量PCR （Q-PCR）、蛋白免疫印迹法及ELISA检测RH35中HIF-1α及VEGF的mRNA及蛋白表达情况。体外侵袭实验（Transwell）检测细胞的体外侵袭迁移力。结果 CCK-8显示在CoCl2浓度为50、100、150μmol／L时，RH35细胞体外生长增殖活性与0μmol／L 无差异（P＞0．05），在200μmol／L 时，RH35增殖活性降为（62．90±1．57）％，与0μmol／L时比较差异有统计学意义（P #0．01）。Q-PCR 显示 RH35细胞 HIF-1α及VEGF的mRNA表达随CoCl2浓度升高而增加，并且HIF-1α与VEGF呈显著正相关（r＝0．980，P＝0．020）。蛋白免疫印迹法及ELISA显示HIF-1α及VEGF的蛋白表达均随CoCl2浓度升高而增加。Tr-answell显示RH35随CoCl2浓度增高，侵袭能力增加。结论 CoCl2化学缺氧模型可较好的模拟缺氧引起的肝癌细胞HIF-1α上调，使VEGF表达增加，并且两者具有相关性；通过上调HIF-1α可增加肝癌细胞的侵袭能力，为下一步实验奠定基础。