核桃WRKY4基因的克隆与表达分析

• 作者: 刘庆忠 宗晓娟 张力思 徐丽 王甲威 陈新 魏海蓉
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 核桃 WRKY转录因子 基因克隆 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1188-1196
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2014.07.1188

摘要

WRKY转录调控因子广泛参与植物的生长发育、生物胁迫和非生物胁迫等生理过程.本研究利用reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)及rapid amplification of cDNA ends (RACE)技术克隆了核桃(Juglans regia L.)WRKY基因cDNA全长序列,命名为WRKY4(GenBank登录号为KC795551.1).结果表明,克隆到的片段长度为2 174 bp,完整开放阅读框为1 554 bp,编码517个氨基酸.序列分析表明WRKY4基因含有2个WRKY保守结构域和2个C2H2锌指结构域,属于WRKY基因家族第1类成员.利用实时荧光定量PCR分析4℃低温和自然低温条件对该基因表达的影响以及组织表达模式.结果表明WRKY4受低温诱导表达,能够在低温胁迫的早期响应这一生理过程.WRKY4在树皮(韧皮部)、雌花、花芽和叶片中均有表达,且在树皮中表达量最高,具有组织特异性.研究结果可为核桃抗寒基因工程育种提供基因资源.