转基因水稻T1C-1 Bt Cry1C基因的克隆、表达、纯化和实质等同性研究

• 作者: 任方方 刘启文 吴洋洋 吴潇 王玉炯 胡瑞丽 赵凯 赵笑 韩芳婷
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因水稻 Cry1C蛋白 实质等同性 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 21-27
• 页数: 7页
• 分类号: S511|Q943.2
• 字数: 6020字
• 语种: 中文

摘要

将质粒pET30a(+)-Cry1C转入大肠杆菌进行表达,对其表达条件进行了优化,并评价了蛋白的表达和纯化效果.结果显示:最佳诱导时间、IPTG的终浓度和诱导温度分别为5 h、0.6 mmol/L和25 ℃.大多数的靶蛋白以包涵体形式表达,通过纯化和复性,最终获得高纯度有活性的靶蛋白.通过SDS-PAGE WesternBlot、糖蛋白测定、LC MS/MS鉴定和杀虫试验表明:大肠杆菌中表达的Cry1C蛋白和转基因水稻的Cry1C蛋白具有实质等同性.