紫花苜蓿DREB1基因的原核表达与蛋白纯化

• 作者: 刘军和 崔文艺 李大红 闫艳
• 来源期刊: 生态科学
• 学科: 生物学
• 关键词: MsDREB1基因 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 759-763
• 页数: 5页
• 分类号: Q948
• 语种: 中文
• DOI: 10.14108/j.cnki.1008-8873.2014.04.020

摘要

构建MsDREB1基因的原核表达载体,对表达产物进行鉴定和纯化,为研究DREB1基因在植株中功能奠定基础.用冷酚法从紫花苜蓿提取RNA,并转化成cDNA,然后将其克隆至pET32a原核表达载体,构建重组载体pET32a-DREB1.用重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达后进行SDS-PA GE分析,用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化.结果表明,原核表达载体构建正确;SDS-PA GE分析,出现了与DNAMAN预测的43.2 kd大小一致的蛋白条带;经分析重组蛋白纯化率达到90％以上.