四种大鼠视网膜固定方法对冰冻切片制作的影响

• 作者: 万新顺 张倩 李晓鹏
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 组织病理学 视网膜 冰冻切片 大鼠
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 898-901
• 页数: 4页
• 字数: 3470字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2014.10.008

摘要

背景 视网膜的组织病理学检查是眼科基础研究和临床检查的重要方法,不同的固定方法对视网膜的组织结构和检查结果产生重大影响.目前国内制备视网膜切片时多采用前固定法,而国外多采用后固定法,国内缺少对不同的固定方法比较的研究. 目的 对4种不同固定方法制作的大鼠视网膜组织冰冻切片进行比较,确定更简单、有效的视网膜组织病理学切片制备方法. 方法 将40只大鼠按照随机数字表法分为长时多聚甲醛组(质量分数4％多聚甲醛固定过夜,n=10)、短时多聚甲醛组(4％多聚甲醛固定2～3h,n=10)、甲醛-冰醋酸-乙醇(FAA)组(FAA混合固定液固定,n=10)和冷丙酮组(冷丙酮后固定,n=10).迅速摘除眼球后,将长时和短时多聚甲醛组分别置入4％多聚甲醛中,FAA组置入FFA混合固定液中固定相应时间,然后进行OCT包埋和切片,而冷丙酮组则先进行液氮速冻和OCT包埋,然后在冷丙酮中固定,切片.4个组大鼠眼杯均行苏木精-伊红染色,光学显微镜下观察各组视网膜组织形态. 结果 在4种视网膜固定方法中,长时多聚甲醛组视网膜结构疏松,内核层(INL)和外核层(ONL)细胞堆积;短时多聚甲醛组大鼠视网膜层间排列较疏松,但INL和ONL细胞排列较长时多聚甲醛组规则;FAA组大鼠视网膜结构排列较紧密;冷丙酮组大鼠视网膜各层次结构清晰,组织完整,ONL、INL和神经节细胞层(GCL)细胞排列规则,形态接近正常活体组织.结论 在视网膜组织病理学检查中,前固定法制备的视网膜切片对组织形态影响较大,直接液氮速冻法(后固定法)是一种简单、省时且不影响组织形态的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万新顺	新乡医学院第三附属医院眼科	24	126	7.0	10.0
2	李晓鹏	新乡医学院第三附属医院眼科	46	315	11.0	16.0
3	张倩	南阳市中心医院眼科	4	2	1.0	1.0