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摘要:
旨在研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)真核起始因子5(EteIF5)和5A(EteIF5A)的功能,克隆、表达并分析EteIF5和EteIF5A在Etenella广东株不同发育阶段的表达量变化.根据E.tenella基因组数据预测的编码序列设计引物,采用RT PCR方法克隆EteIF5和EteIF5A的ORF,插入酶切位点后连接到原核表达载体pMAL-c2x进行诱导表达.提取E.tenella5个发育阶段(/时期)的总RNA,使用qRT-PCR检测EteIF5和EteIF5A转录的动态变化.测序结果表明,克隆获得的EteIF5和EteIF5A ORF全长分别为1 248和486 bp,各自编码31 5和161个氨基酸,均在大肠埃希菌表达系统中成功表达.qRT-PCR定量分析显示,eIF5和eIF5A的mRNA在E.tenella不同发育阶段转录量不同,子孢子阶段最高,在孢子化卵囊阶段最低.首次克隆获得了E.tenella eIF5和eIF5AORF,揭示EteIF5和EteIF5A mRNA的转录量在不同发育阶段有显著差异.试验结果为进一步研究EteIF5和EteIF5A的功能,从EteIF5A合成途径研制新型抗球虫药提供了试验基础.
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文献信息
篇名 柔嫩艾美耳球虫真核起始因子5和5A基因的克隆表达及转录动态分析
来源期刊 畜牧兽医学报 学科 农学
关键词 柔嫩艾美耳球虫 真核起始因子 基因克隆 表达差异 qRT-PCR
年,卷(期) 2014,(12) 所属期刊栏目 预防兽医
研究方向 页码范围 2019-2027
页数 9页 分类号 S855.9
字数 5150字 语种 中文
DOI 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.12.016
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研究主题发展历程
节点文献
柔嫩艾美耳球虫
真核起始因子
基因克隆
表达差异
qRT-PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
畜牧兽医学报
月刊
0366-6964
11-1985/S
大16开
北京海淀区圆明园西路2号
82-453
1956
chi
出版文献量(篇)
5501
总下载数(次)
6
总被引数(次)
62883
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
论文1v1指导