腺病毒介导的PML(NLS-)过表达对白血病NB4细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 刘北忠 朱新瑜 王慧 蒋开玲 阳小群 马鹏鹏
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: PML(NLS-) 急性早幼粒细胞白血病 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1327-1332
• 页数: 6页
• 分类号: R557
• 字数: 3675字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用腺病毒介导PML(NLS-)的过表达,探讨PML(NLS-)对NB4白血病细胞增殖凋亡的影响.方法 重组腺病毒质粒Ad-PML(NLS-)经Pac Ⅰ酶切线性化后转染AD293细胞,获得重组腺病毒Ad-PML(NLS-),经4轮扩增后,测定重组腺病毒滴度;重组腺病毒感染NB4细胞,荧光显微成像和流式细胞术检测感染效率,RT-PCR法和Western blot法检测NB4细胞中PML(NLS-)的转录及表达水平,MTT实验观察细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期及凋亡.结果 重组腺病毒质粒Ad-PML(NLS-)经酶切和测序鉴定正确,经4轮扩增病毒滴度为1 ×1010pfu/mL;重组腺病毒Ad-PML(NLS-)感染NB4细胞效率达75％,PML(NLS-)基因可在NB4细胞中高效表达;NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和空病毒载体感染组(P＜0.05),S期细胞比例明显增高(P＜0.05),G2期细胞比例明显减少(P＜0.05);实验组细胞凋亡率明显低于空病毒感染组(P＜0.05).结论 PML(NLS-)过表达能够促进白血病NB4细胞的体外增殖能力,抑制其凋亡.