沙拉沙星完全抗原的合成及多克隆抗血清制备

• 作者: 刘儒彪 刘玺 孙亚宁 张改平 王方雨 胡骁飞 蔡齐超 邓瑞广
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 沙拉沙星 人工抗原 ELISA 多抗血清
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 167-171
• 页数: 5页
• 分类号: S859.84
• 字数: 3400字
• 语种: 中文

摘要

为了制备沙拉沙星(SARA)多克隆抗血清,采用碳二亚胺(EDC)法将SARA分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联,制备了免疫原SARA-BSA、包被原SARA-OVA.经SDS-PAGE电泳与紫外扫描初步判定偶联成功,然后用免疫原SARA-BSA分别按20、50μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,每次间隔3周,于最后1次免疫10 d后断尾采血,制备多克隆抗血清.采用间接ELISA方法测定多克隆抗血清效价,间接竞争ELISA方法测定其敏感性和特异性.结果显示,制备多克隆抗血清效价均达1∶10 000以上,IC50为623.5 ng/mL,且与其他药物交叉反应率低,具有较好的特异性.