目的:建立同时测定人血浆中异烟肼、吡嗪酰胺、利福平和左氧氟沙星的质量浓度的高效液相色谱法。方法血浆样品采用甲醇沉淀蛋白法萃取,采用 C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm ,5.0μm),用甲醇,乙腈,0.05 mol ? L -1 KH2 PO3水溶液(三乙胺调pH6.0)进行梯度洗脱,柱温40℃,进样量20μL ,采用 PDA 紫外检测器。结果以峰面积外标法定量,异烟肼在0.20~25.6μg ? mL -1范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9997),吡嗪酰胺在0.20~25.6μg ? mL -1范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),利福平在0.40~25.6μg ? mL -1范围内与峰面积线性关系良好(r =0.9993),左氧氟沙星在0.20~25.6μg ? mL -1范围内与峰面积线性关系良好(r =0.9994),回收率为85%~115%,日内、日间精密度 RSD 均<9.6%(n =5)。结论该方法专属性强、灵敏度高,准确性好,适用于同时测定人血浆样品中异烟肼、吡嗪酰胺、利福平和左氧氟沙星的质量浓度。