根癌农杆菌介导的葡萄遗传转化体系的优化

• 作者: 唐晓萍 李晓梅 王国平 王敏 董志刚 谭伟 赵旗峰 马小河
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 葡萄 根癌农杆菌 遗传转化 npt-Ⅱ基因
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1169-1174
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2014.07.1169

摘要

以梅鹿辄葡萄离体叶片为转化材料,对根癌农杆菌介导的遗传转化过程中涉及的几个主要影响因素:抗菌素羧苄青霉素(C arb)的浓度、乙酰丁香酮(AS)的浓度、农杆菌菌液的浓度及卡那霉素筛选压进行优化.结果表明,抗菌素羧苄青霉素在浓度300mg·L-1下即可有效去除农杆菌,且对胚性愈伤组织的分化的影响不大;乙酰丁香酮(AS)的最适浓度为50μm·L-1;农杆菌菌液的浓度控制在OD6000.5 ～0.7时转化率最高;卡那霉素的筛选浓度控制在100mg·L-1.利用优化的农杆菌介导法进行转化,对再生苗进行PCR检测,结果显示,外源基因已导入了葡萄基因组中.本研究优化了农杆菌介导的葡萄遗传转化影响因素,并获得了转基因植株.