EB病毒融合蛋白Zta-P54在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定

• 作者: 张春艳 李玉林 王云龙 王继创 白晓静 程蕾 米海 邓黎黎
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: EB病毒 Zta-P54融合蛋白 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 页码范围: 173-178
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

为获得能用于检测试剂盒的高纯度具有活性的EB病毒融合蛋白，以pGEX5T-BZLF1-BMRF1质粒为模板进行PCR扩增得到BZLF1-BMRF1融合基因，将其插入pET32a中，构建表达质粒pET32a/BZLF1-BMRF1。将该质粒转入大肠杆菌培养，经IPTG诱导获得Zta-P54融合蛋白。用DEAE-Sepharose CL-6B和Ni-NTA亲和层析纯化，并通过SDS-PAGE和Western blot对Zta-P54融合蛋白进行鉴定。双酶切鉴定和测序结果显示成功构建pET32a/BZLF1-BMRF1质粒，SDS-PAGE显示该蛋白相对分子量约为60 kD，与预期结果一致。纯化后获得纯度为96.5%的Zta-P54融合蛋白。Western blot检测该蛋白有良好的生物活性和反应特异性。因此，成功构建pET32a/BZLF1-BMRF1质粒，在大肠杆菌中可溶性表达。最终获得纯度高、生物活性好的融合蛋白。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王云龙	郑州大学生物工程系	47	252	9.0	13.0
3	李玉林		35	123	7.0	9.0
4	张春艳	郑州大学生物工程系	28	58	5.0	7.0
5	邓黎黎		5	12	2.0	3.0
8	王继创		16	50	3.0	6.0
9	程蕾		10	32	3.0	5.0
10	米海		2	4	2.0	2.0
11	白晓静		1	2	1.0	1.0