低钾型周期性麻痹相关的Cchl1a3基因R528H敲入小鼠模型的构建

• 作者: 姚合斌 徐宏燕 王大鹏 王晓英 雍曾花
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 低钾型周期性麻痹 Cchl1a3 基因敲入 小鼠 模型
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-13
• 页数: 7页
• 分类号: R332
• 字数: 5312字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2014.007.002

摘要

目的：构建低钾型周期性麻痹相关的Cchl1a3基因R528H敲入小鼠模型。方法将 Cchl1a3-knock-in打靶载体电转染ES细胞，经过G418和Ganciclovoir筛选阳性ES细胞克隆并用PCR和DNA测序法鉴定。将阳性ES克隆注射到小鼠囊胚，获得嵌合体小鼠。通过杂交获得的杂合子小鼠与FLP小鼠交配繁育获得去neo杂合子小鼠，并用PCR和DNA测序进行鉴定。将去neo杂合子小鼠交配得到纯合子后代，进行生长发育等方面的观察。结果打靶载体成功转染ES细胞，PCR和DNA测序法证实9个ES细胞克隆发生正确的同源重组。通过显微注射获得7只嵌合体小鼠。将嵌合体小鼠交配繁育的杂合子小鼠和FLP小鼠交配获得9只去neo杂合子小鼠，最终得到15只去neo纯合子小鼠。该小鼠在发育至性成熟阶段，精神、饮食及活动状态良好，但是在4个月龄时逐渐出现脱毛，皮肤破溃甚至死亡。结论成功构建Cchl1a3基因 R528H 突变的纯合子小鼠，为研究人类CACNA1S基因功能和阐明低钾型周期性麻痹发生的分子机制奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王大鹏	解放军海军总医院基础医学研究中心	12	76	5.0	8.0
2	王晓英	解放军海军总医院内分泌科	2	5	1.0	2.0
3	姚合斌	安徽医科大学海军临床学院	6	12	2.0	3.0
5	徐宏燕	安徽医科大学海军临床学院	4	11	2.0	3.0
8	雍曾花	安徽医科大学海军临床学院	1	5	1.0	1.0