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摘要:
目的:研究外源性线粒体融合素基因-2(Mfn2)表达对骶韧带成纤维细胞的增殖及其合成前胶原蛋白功能的影响。方法:取新鲜骶韧带组织,用组织块法在体外培养出成纤维细胞。将第2~4代细胞分组:转染LV-Mfn2-GFP组(Mfn2+组),转染LV-GFP组(Mfn2-组)和未转染组(对照组)。流式细胞仪检测细胞绿色荧光蛋白(GFP)表达,RT-PCR和Western blot检测Mfn2表达。细胞计数和cck-8法检测Mfn2对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期分布。RT-PCR和Western blot检测细胞前胶原1 A1/1A2/3A1的表达。结果:转染慢病毒的成纤维细胞GFP蛋白表达率73.2%~79.1%,转染Mfn2+组成纤维细胞稳定高表达Mfn2蛋白,显著高于Mfn2-组和对照组(P<0.05,both)。cck-8实验提示,转染表达Mfn2基因96h后,成纤维细胞增殖明显受到抑制,Mfn2+组细胞数显著低于 Mfn2-组和未转染组(P<0.05 both);DNA直方图分析法测定显示转染Mfn2基因的细胞大部分停滞于G0/G1期,Mfn2+组G0/G1期细胞比例(60.7%±3.26%),显著高于 Mfn2-组(43.2%±3.32%)和对照组(40.8%±2.28%),(P<0.05, both)。半定量RT-PCR和Western blot示Mfn2+组成纤维细胞合成表达前胶原1A1/1A2/3A1显著低于Mfn2-组和对照组(P<0.05,all)。结论:Mfn2基因在体外转染成纤维细胞后,抑制细胞增殖并使成纤维细胞前胶原蛋白表达下降,可能是导致骶韧带细胞外基质减少,影响韧带纤维数量和质量的重要原因。
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文献信息
篇名 线粒体融合素基因-2对人骶韧带成纤维细胞增殖及功能的影响
来源期刊 中国性科学 学科 医学
关键词 线粒体融合素基因-2 成纤维细胞 前胶原蛋白 增殖 细胞周期
年,卷(期) 2014,(6) 所属期刊栏目 论著 -- 性医学
研究方向 页码范围 22-26
页数 5页 分类号 R167
字数 5434字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1672-1993.2014.06.010
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 廖秦平 北京大学第一医院妇产科 266 3417 33.0 48.0
2 陆叶 北京大学第一医院妇产科 24 296 9.0 17.0
3 陈华云 北京大学第一医院妇产科 2 0 0.0 0.0
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线粒体融合素基因-2
成纤维细胞
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细胞周期
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期刊影响力
中国性科学
月刊
1672-1993
11-4982/R
大16开
北京海淀区学院路38号北京大学医学部
80-197
1993
chi
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