针对丝聚合蛋白基因RNA干扰重组慢病毒载体的构建及筛选

• 作者: 党宁宁 宋海燕 张敏 王彦 边胜男 逄曙光
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 丝聚合蛋白 RNA干扰 慢病毒载体 HACAT细胞
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-11
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2524字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建丝聚合蛋白(FLG)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体.方法 设计针对人FLG基因的mRNA干扰靶序列,合成相应双链DNA,通过BamH I和EcoRI酶切后的PGLV/H1/GFP载体连接产生shRNA载体,并与pHelper 1.0、pHelper 2.0两种载体共转染293T细胞培养,获得重组慢病毒载体后,转染目的细胞,实现针对FLG基因的RNA干扰.结果 经鉴定该实验的慢病毒载体,对人正常皮肤细胞HACAT干扰效果达75％～95％,以RNAi3的沉默效应最佳.结论 重组的慢病毒载体为有关FLG基因的进一步研究奠定良好实验基础,并能广泛用于体内基因治疗及基因功能研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张敏	山东大学附属济南市中心医院皮肤科	132	841	16.0	22.0
2	王彦	山东大学附属济南市中心医院皮肤科	17	47	3.0	6.0
3	逄曙光	山东大学附属济南市中心医院皮肤科	31	147	8.0	11.0
4	党宁宁	山东大学附属济南市中心医院皮肤科	10	44	4.0	6.0
5	宋海燕	山东大学附属济南市中心医院皮肤科	2	18	1.0	2.0
6	边胜男	山东大学附属济南市中心医院皮肤科	2	4	1.0	2.0