miR-194慢病毒表达质粒的构建及对人骨肉瘤细胞系U2-OS转移的相关研究

• 作者: 卞娜 周勇 杨彤涛 沙浩 王鑫 董川 蔡成魁 赵廷宝 韩康 颜世举 马保安 马琼
• 来源期刊: 中国肿瘤临床
• 关键词: 骨肉瘤 miR-194 慢病毒 成骨肉瘤细胞系U2-OS 转移
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 753-757
• 页数: 5页
• 字数: 4091字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8179.20140226

摘要

目的：通过构建携带针对miR-194的慢病毒沉默及过表达载体，研究miR-194对骨肉瘤细胞转移的影响。方法：以miR-194前体及成熟体序列为模板，设计引物，进行PCR扩增，酶切后克隆于慢病毒载体plent-i GFP中，转染293T细胞，包装慢病毒颗粒，检测滴度，最终对人骨肉瘤细胞系U2-OS进行感染。获取稳定感染细胞后，进行Transwell、划痕等实验。结果：1）慢病毒表达质粒构建成功，沉默表达及过表达重组慢病毒的滴度分别为4×108TU/mL及1.5×108TU/mL；2）稳定过表达miR-194的人骨肉瘤细胞系U2-OS的转移能力较其他组有明显降低（P<0.01）。结论：成功构建了miR-194慢病毒表达载体，miR-194的表达水平对U2-OS细胞的转移能力具有显著影响，miR-194可能成为骨肉瘤治疗的潜在新靶点。