小反刍兽疫病毒血凝素蛋白与受体蛋白SLAM的相互作用

• 作者: 才学鹏 朱学亮 窦永喜 蒙学莲 骆学农
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 血凝素蛋白 SLAM 转染 免疫共沉淀 相互作用
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 426-433
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4597字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.03.012

摘要

旨在利用免疫共沉淀技术验证小反刍兽疫病毒血凝素蛋白和受体蛋白SLAM间的相互作用.鉴于截短的H蛋白仍具有正常的与细胞受体结合的能力,分别构建pcDNA3.1-tH真核表达载体和SLAM及其缺失突变体(m1-胞外区、m2-无信号肽胞外区、m3-胞外区N端29-136位氨基酸和m4-胞外区C端137-240位氨基酸)编码基因的pEGFP-N1系列真核表达载体,将测序正确的重组质粒共转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1细胞株,利用免疫共沉淀技术验证tH蛋白与SLAM蛋白相互作用的关键氨基酸区段.结果表明,成功构建了预期的重组表达载体,转染CHO细胞后目的蛋白正确表达;免疫共沉淀时,tH能与SLAM、m1、m2和m3蛋白发生反应,但没有与m4蛋白发生反应.由此可知,SLAM N端29-136位氨基酸是决定SLAM与PPRV H蛋白结合的关键氨基酸区段,这与麻疹病毒属其他宿主SLAM受体的研究结果一致.