蓖麻质膜水通道蛋白PIP1.3在仓鼠卵巢细胞中的转运功能

• 作者: 刘灿阳 戴聪杰 朱国立 林婷 王云 王芳 董乐 许珊珊 谢小宾
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 蓖麻 质膜水通道蛋白 真核表达 转运功能
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1880-1888
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13592/j.cnki.ppj.2014.1040

摘要

为研究蓖麻质膜水通道蛋白PIP1.3的转运功能,采用RT-PCR技术扩增基因PIP1.3的全长编码区cDNA序列(861 bp),将该序列亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His A,酶切、测序分析表明,重组质粒pcDNA3.1PIP1.3-Myc-His阅读框架正确。将pcDNA3.1PIP1.3-Myc-His和连接氯离子敏感性绿色荧光蛋白突变体(EYFP-H148Q-V163S)的pcDNA3.1Hygro-EY-FP-H148Q-V163S重组质粒稳定共转染至中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞中, RT-PCR和Western blot分析表明, PIP1.3的mRNA和蛋白质在选定CHO细胞克隆中高表达。分别通过荧光法和同位素标记的14C-甘油摄入实验测定该CHO细胞对水分和甘油的通透性,结果表明,该CHO细胞表达的PIP1.3对水分子的转运能力很低,但能选择性转运甘油。