巯基微球协助重组γ-猪肝酯酶包涵体体外复性

• 作者: 于洪巍 关怡新 姚善泾 黄寿锟
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 生物分离 蛋白质复性 聚集(作用) 二硫键 巯基微球 重组γ-猪肝酯酶
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 305-312
• 页数: 8页
• 分类号: TQ028.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0438-1157.2014.01.040

摘要

猪肝酯酶(PLE)是一种广泛应用于光学活性醇或羧酸合成的水解酶.大肠杆菌异体表达为大规模生产猪肝酯酶γ同工酶提供了可能,但表达过程中会形成包涵体,需经体外重折叠恢复其生物活性.针对γ-PLE含二硫键的特点,制备了三种不同巯基负载量的功能聚合物微球SG-DTT(6.1 μmol ·g-1、25.2 μmol·g-1和143.4 μmol·g-1),将其应用于协助γ-PLE包涵体体外复性,并考察了微球浓度、pH、温度和尿素浓度对复性效果的影响.复性过程需要适宜的氧化还原环境,较高的巯基负载量微球协助复性效果较好,当γ-PLE浓度为1000 μg·ml-1时,微球协助复性后γ-PLE的活性可达到1885 U·L-1,比对照组提高了72％.研究表明,巯基微球能有效促进二硫键的正确配对,阻止蛋白分子间的聚集,是一种新型高效的复性添加剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	关怡新	浙江大学化学工程与生物工程学系	67	627	12.0	20.0
2	姚善泾	浙江大学化学工程与生物工程学系	224	2284	23.0	34.0
3	于洪巍	浙江大学化学工程与生物工程学系	12	21	3.0	4.0
4	黄寿锟	浙江大学化学工程与生物工程学系	1	5	1.0	1.0