电离辐射对乳腺癌干细胞活性氧、凋亡和细胞周期的影响

• 作者: 刘扬 方芳 李丹利 王志成 白杨 赵雪莲 龚守良
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 电离辐射 乳腺肿瘤 干细胞 悬浮培养 活性氧 细胞凋亡 细胞周期
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1132-1137
• 页数: 6页
• 分类号: R737.9
• 字数: 3821字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140602

摘要

目的：研究电离辐射对乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞活性氧（ROS）、凋亡和周期分布的影响，探讨乳腺癌干细胞辐射抵抗产生的机制。方法：采用含多种生长因子的无血清培养基悬浮培养人乳腺癌 MCF-7细胞系，分为乳腺癌细胞 MCF-7组、乳腺癌干细胞 MCF-7-S组、MCF-7＋8 Gy组和 MCF-7-S＋8 Gy组。8 Gy电离辐射后4～24 h，分别采用2′，7′-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）、AnnexinⅤ-FITC/PI和 PI染色，流式细胞术检测细胞中 ROS水平、凋亡细胞百分比和各细胞周期时相细胞百分比。结果：含多种生长因子无血清悬浮培养7 d后，形成数百个细胞聚集而成的乳腺癌干细胞微球；流式细胞术检测， CD4＋＋CD24－表型的乳腺癌干细胞高达75.20％。随着时间的延长，MCF-7组和 MCF-7-S组细胞中 ROS水平和细胞凋亡均呈增加的趋势，在12和24 h 达到较大值；在4、8、12和24 h时，MCF-7-S组细胞中 ROS水平均低于 MCF-7组（P＜0.05或P＜0.01）， MCF-7-S组凋亡细胞百分比只在8 h显著高于 MCF-7组细胞（P＜0.05）；MCF-7＋8 Gy组细胞中 ROS水平（4、8、12和24 h）和凋亡细胞百分比（12 h）显著增加（P＜0.05），MCF-7-S＋8 Gy组凋亡细胞百分比（4、8、12和24 h）显著降低（P＜0.05或P＜0.01），MCF-7-S＋8 Gy组细胞中 ROS水平无明显变化。在12 h时，与MCF-7组比较， MCF-7-S组细胞 G0/G1期和 G2/M期细胞百分比显著降低（P＜0.05）， S期细胞百分比显著增加（P＜0.05）；MCF-7＋8 Gy组细胞 G2/M期细胞百分比显著增加（P＜0.05），而 MCF-7-S＋8 Gy组无明显变化。结论：电离辐射导致 MCF-7中 ROS水平和凋亡增加， G2/M期阻滞，而对 MCF-7-S则无明显影响，提示MCF-7-S辐射抵抗可能与 ROS水平、细胞凋亡和 G2/M期阻滞有关。