鸡传染性支气管炎病毒HH06株膜蛋白多克隆抗体制备及生物学功能研究

• 作者: 任晓峰 李广兴 杜威威 杨贵君 洪琴 潘龙 王新 白妍 韩溪 马玲
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性支气管病毒 膜蛋白 多克隆抗体 间接免疫荧光试验 免疫印迹试验
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 57-63
• 页数: 7页
• 分类号: S831|S432.4+1
• 字数: 5501字
• 语种: 中文

摘要

文章通过RT-PCR方法扩增传染性支气管炎病毒（IBV）HH06株M全长基因，经抗原性和亲水性分析，将M部分序列成功亚克隆于pET-30a（+）和PVAX1载体中。将阳性重组质粒pET30a-M转化E. coli Rosetta （DE3）感受态细胞，诱导表达获得20 ku重组M蛋白。Western blot检测表明，重组蛋白能够与IBV参考阳性血清反应。以纯化重组M蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体，其ELISA效价达到1??218；Western blot结果证实，其具有良好的反应性和特异性。间接免疫荧光试验表明，抗M蛋白多克隆抗体可检测到PVAX-M1转染BHK-21细胞表达的M蛋白，与IBV HH06毒株具有很好的特异性反应。病毒感染抑制试验表明，多抗血清对IBV Beaudette株的抑制率可达到25.9%。为IBV检测及M蛋白功能的研究奠定基础。