氟喹诺酮药物格林沙星抗体制备及其icELISA方法建立

• 作者: 卢蓝蓝 吕书为 周丽君 唐秋实 孙远明 沈玉栋 王弘 王睿娇 雷红涛
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 格林沙星 多克隆抗体 酶联免疫吸附分析方法 异源包被
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 187-193
• 语种: 中文

摘要

目的:制备格林沙星多克隆抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附分析方法(icELISA).方法:采用碳二亚胺法将格林沙星偶联于牛血清白蛋白(BSA)作为免疫原,免疫新西兰大白兔获多克隆抗体;采用活泼脂法分别将格林沙星、克林沙星、加替沙星、培氟沙星和沙拉沙星偶联于卵清白蛋白(OVA),制备5种包被抗原并做性能比较;建立icELISA方法并对其灵敏度和特异性进行评价.结果:成功制备了免疫原和包被抗原及抗体,抗体效价最高达64000倍.以克林沙星-OVA作异源包被,建立的icELISA方法灵敏度最高,半抑制药物浓度(IC50)为9.14 ng/mL,检测限(IC10)为0.9 ng/mL,检测范围(IC20～IC80)为2.3～36.4 ng/mL,与其他喹诺酮类药物无明显交叉反应.结论:首次制备出格林沙星抗体并建立间接竞争酶联免疫吸附检测方法,该法灵敏度高、特异性强,为分析生物样品中格林沙星含量的测定提供了1种新的方法.