东北白鹅CD4基因的克隆及其胞外区的表达与抗血清的制备

• 作者: 张文龙 张雪莲 母晓宇 王君伟 邵建伟 马波 高明春 魏双施
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 东北白鹅 CD4 基因表达 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 639-646
• 页数: 8页
• 分类号: S852.4
• 字数: 5541字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.04.019

摘要

本研究根据GenBank公布的绿头鸭CD4(AF378701)基因序列设计引物,RT-PCR获得东北白鹅CD4基因.根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD4胞外区基因,并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3) pLysS系统中进行原核表达.经IPTG诱导重组蛋白获得表达,Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白,以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗鹅CD4胞外区抗血清.Ⅰ-ELISA、Western blot和流式细胞仪分析表明抗血清可特异识别重组蛋白以及分离获得的东北白鹅外周血T淋巴细胞,间接免疫荧光试验证实纯化的抗血清可特异性识别瞬时真核表达的鹅CD4胞外区蛋白.以上结果说明制备的抗血清可作为鹅CD4+T淋巴细胞的检测试剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马波	东北农业大学动物医学学院	71	491	14.0	18.0
2	王君伟	东北农业大学动物医学学院	214	1491	20.0	26.0
3	高明春	东北农业大学动物医学学院	49	148	7.0	8.0
4	魏双施	东北农业大学动物医学学院	6	34	4.0	5.0
5	母晓宇	东北农业大学动物医学学院	7	22	3.0	4.0
6	张文龙	东北农业大学动物医学学院	18	74	6.0	7.0
7	邵建伟	东北农业大学动物医学学院	2	12	2.0	2.0
8	张雪莲	东北农业大学动物医学学院	2	12	2.0	2.0