两种方法在二斑叶螨电压门控钠离子通道基因突变检测中的应用

• 作者: 周兴隆 岳秀利 杨顺义 沈一凡 沈慧敏 王进军 郭金梅
• 来源期刊: 草业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 二斑叶螨 甲氰菊酯 靶标突变 直接测序法 PCR-RFLP法
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 153-160
• 页数: 8页
• 分类号: S433.7
• 字数: 4988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11686/cyxb20140517

摘要

靶标突变是二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂产生高抗性的重要原因，而用于靶标突变检测的方法较多，有必要寻找一种经济、灵敏且有效的方法进行突变检测。本研究根据二斑叶螨电压门控钠离子通道（voltage-gated sodi-um channels，VGSCs）基因上已报道的3个点突变（L1022V、A1215D和F1538I），采用PCR产物直接测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）两种不同的方法对二斑叶螨田间种群（WW-R和LZ-R）进行靶标VGSCs 基因突变检测。PCR产物直接测序结果显示，与SS种群相比，WW-R和LZ-R种群VGSCs基因均存在两种氨基酸突变A1215D和F1538I，但没有发现存在F1022V突变，其中A1215D突变发生在结构域ⅡS6-ⅢS1连接处，F1538I突变发生在结构域ⅢS6螺旋处，而采用PCR-RFLP方法只检测出A1215D突变。两种不同的方法对田间采集的二斑叶螨种群VGSCs 基因突变位点检测的比较，为抗菊酯类药剂二斑叶螨种群抗性分子监测技术的建立和抗性治理奠定了基础。