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摘要:
目的:通过观察缺氧预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及锌指核转录因子ZFP580表达的改变,探讨ZFP580的作用及机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,分为3组:(1)缺氧/复氧(H/R)组:H9c2心肌细胞换用模拟缺血溶液(pH=6.2)缺氧(95%N2+5%CO2)培养3 h,复氧培养2 h;(2)缺氧预适应(HPC)组:H9c2心肌细胞经3个循环的短暂缺氧(10 min)/复氧(20 min)处理后,进行同上H/R实验;(3)对照(C)组:正常培养的H9c2心肌细胞。通过MTT染色及LDH水平判定HPC的作用。 Western blotting方法观察心肌细胞中转录因子ZFP580表达及ERK1/2磷酸化情况,以及ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059对ZFP580表达的影响。分别构建高/低表达ZFP580的慢病毒载体并转染H9c2心肌细胞,经H/R实验后利用Annexin V-PE/7-AAD染色及流式细胞术检测H9c2细胞凋亡情况,Western bloting方法观察caspase-3活化情况。结果: HPC能显著改善H/R处理后H9c2心肌细胞存活率降低和LDH漏出的现象。 Western blotting 结果显示,HPC组心肌细胞中ZFP580表达及ERK1/2磷酸化程度较H/R处理组明显上升,且PD98059预处理明显抑制HPC诱导的ZFP580的表达上调。慢病毒介导的基因转染实验发现,ZFP580高表达的H9c2心肌细胞在H/R损伤后凋亡率降低且细胞中活化caspase-3表达下降。结论:HPC可引起心肌细胞中转录因子ZFP580表达上调,ZFP580作为ERK1/2通路的下游靶分子发挥抗心肌细胞凋亡的作用。 ZFP580表达上调可能作为内源性保护机制之一介导了HPC的细胞保护作用。
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文献信息
篇名 转录因子 ZFP580在缺氧预处理抗大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
来源期刊 中国病理生理杂志 学科 医学
关键词 转录因子 锌指 缺氧预处理 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
年,卷(期) 2014,(9) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 1553-1558
页数 6页 分类号 R363
字数 4174字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.09.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 买霞 武警后勤学院细胞生物学与医学遗传学教研室 5 8 2.0 2.0
2 张文成 武警后勤学院生理学与病理生理学教研室 12 28 4.0 4.0
3 孟祥艳 武警后勤学院生理学与病理生理学教研室 6 11 2.0 3.0
4 于海龙 武警后勤学院生理学与病理生理学教研室 2 7 1.0 2.0
5 徐瑞成 武警后勤学院天津市职业与环境危害防制重点实验室 1 1 1.0 1.0
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转录因子
锌指
缺氧预处理
细胞凋亡
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
研究起点
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期刊影响力
中国病理生理杂志
月刊
1000-4718
44-1187/R
大16开
广东省广州市黄埔大道西601号
46-98
1985
chi
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