成骨分化的人脐带血间充质干细胞免疫原性研究

• 作者: 刘广鹏 杨大威 林和敏
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 关键词: 脐带血间充质干细胞 成骨分化 免疫原性 淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 干细胞与组织工程
• 页码范围: 752-757
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1002-1892.20140167

摘要

目的 研究经成骨诱导分化的人脐带血间充质干细胞(umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)表面免疫分子的表达以及体外调节T淋巴细胞增殖反应的功能. 方法 取自愿捐赠的脐静脉血分离获取UCB-MSCs,体外扩增至第3代,行成骨诱导培养2周.流式细胞仪检测成骨诱导分化前后UCB-MSCs免疫分子人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ类分子、HLA-Ⅱ类分子的表达.首先以成骨分化的UCB-MSCs刺激异体T淋巴细胞增殖,未诱导的UCB-MSCs设为对照.共设立UCB-MSCs 1×102、1×103、l×104和1×105个/孔4种不同细胞密度,分为IFN-γ预处理组和未处理组.然后以植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激T淋巴细胞增殖,分别加入上述不同数量级的未诱导与成骨诱导分化的UCB-MSCs,观察对T淋巴细胞增殖的影响,并同时加入IL-2检测对UCB-MSCs抑制T淋巴细胞增殖作用的逆转.最后建立Transwell共培养体系,研究成骨诱导分化的UCB-MSCs对混合T淋巴细胞反应的抑制作用是否为接触抑制性. 结果 未诱导的UCB-MSCs高表达HLA-Ⅰ类分子,不表达HLA-Ⅱ类分子;经成骨诱导分化的UCB-MSCs HLA-Ⅱ类分子的阳性表达率升高.未诱导的UCB-MSCs对异体T淋巴细胞增殖有显著抑制效果,而成骨诱导分化的UCB-MSCs对T淋巴细胞增殖的抑制作用明显减弱(且无细胞数量依赖性),并且在IFN-γ作用后,有刺激T淋巴细胞增殖的效果.密度为l×104个/孔及1×105个/孔时未诱导的UCB-MSCs可抑制PHA刺激的T淋巴细胞增殖,但加入IL-2后该抑制作用被逆转;而成骨诱导分化的UCB-MSCs则不具有抑制T淋巴细胞增殖的作用.Transwell共培养结果表明,与直接接触培养相似,未诱导的UCB-MSCs可显著抑制T淋巴细胞增殖反应,而成骨诱导分化的UCB-MSCs抑制能力明显减弱. 结论 经成骨诱导分化的UCB-MSCs抑制混合T淋巴细胞增殖反应的效果明显低于未经成骨诱导分化的UCB-MSCs,不适合作为骨组织工程或细胞治疗的同种异体种子细胞来源.