基于克隆测序技术的人类白细胞抗原基因高分辨率分型方法的建立

• 作者: 初亚男 周国华 宋沁馨 邢晓清 项铮
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 人类白细胞抗原-B基因 克隆测序技术 Sanger测序 高分辨率基因分型
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 研 究 报 告
• 页码范围: 1574-1579
• 页数: 6页
• 字数: 4919字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.140494

摘要

运用优化的扩增和克隆测序技术，建立了人类白细胞抗原( HLA-B)基因的高分辨率分型方法。针对HLA-B基因保守区序列设计引物进行等位基因扩增，基于质粒不相容原理将杂合型等位基因有效克隆入质粒DNA中，经细菌培养后进行Sanger测序，根据测序结果经ClustalX2软件分析和IMTG/HLA数据库的BLAST比对即可完成HLA-B基因的高分辨率分型。利用建立的方法对7例临床样本进行了HLA-B基因分型，并且与第三方直接碱基序列分析基因分型技术( PCR-SBT)进行比对，结果完全一致。本方法无需专业分型软件，准确度高，成本低；采用通用引物进行等位基因的扩增和测序，无需传统方法中繁琐的引物设计和过程优化，实现了HLA-B基因的高分辨率分型。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	初亚男	南京军区南京总医院药理科	7	35	3.0	5.0