基于慢病毒载体系统构建重组JSRV-NM假病毒

• 作者: 吴志敏 张斌 朱泽 李光明 程彬 董莉真 龚淑敏
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: JSRV-NM病毒 假病毒 慢病毒载体 env基因 病毒包装
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 749-751
• 页数: 3页
• 分类号: Q939.47
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2014.08.004

摘要

目的：采用慢病毒质粒结构重组JSRV-NM假病毒，克服JSRV-NM病毒只能通过绵羊支气管穿刺接种扩增，不能通过体外细胞培养扩增的问题。方法采用慢病毒高效包装系统pMD.G、pCMV-HIV△8.2和pHIV-eGFP，以JSRV-NM病毒的env包膜质粒pCMVJSRV-NM替代VSV-G病毒的包膜质粒pMD.G，转染293T细胞，复制、包装并产出重组的JSRV-NM假病毒。用real-time PCR检测WPRE表达来测定假病毒的滴度，用接种24孔板的293T细胞检测假病毒感染力。结果成功重组了基于慢病毒质粒结构的JSRV-NM假病毒，可超速离心浓缩成高滴度（1×108 TU/mL）的病毒，Lv-JSRV-NM包膜与Lv-VSV-G包膜按感染复数（MOI）=3的比例感染Hela细胞具有相同的感染能力。结论基于慢病毒质粒构建的JSRV-NM假病毒，能够在293T细胞中复制和扩增，产出的假病毒具有稳定性、感染力和安全性，符合二级生物实验室安全的要求。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张斌	天津医科大学基础医学院病原生物学教研室	39	222	7.0	13.0
2	朱泽	天津医科大学基础医学院病原生物学教研室	21	113	6.0	10.0
3	李光明	天津医科大学基础医学院病原生物学教研室	23	67	4.0	7.0
4	吴志敏	天津医科大学基础医学院病原生物学教研室	4	16	2.0	4.0
5	董莉真	天津医科大学基础医学院病原生物学教研室	3	15	2.0	3.0
6	程彬	天津医科大学基础医学院病原生物学教研室	3	9	2.0	3.0