RNA干扰技术对犬小孢子菌PQ-LRP基因沉默的研究

• 作者: 刘建雯 刘金鹏 张芳芳 杨国玲 赵晓宣 陈昕宜
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 犬小孢子菌 RNA干扰 基因,PQ-LRP 基因沉默
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 559-562
• 页数: 4页
• 字数: 3382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.08.007

摘要

目的 构建犬小孢子菌PQ-LRP基因RNA干扰载体,探讨RNA干扰载体对犬小孢子菌PQ-LRP基因表达的影响.方法 用根癌农杆菌介导的T-DNA插入突变技术,加入多克隆位点,引入潮霉素抗性基因,先后构建PUC-PLULT、PCB309-PLULT载体.应用实时PCR方法检测PCB309-PLULT载体对犬小孢子菌PQ-LRP基因表达的干扰作用.结果 构建了中间载体PUC-PLUT、PUC-PLULT,并通过PCR、基因测序进行鉴定.成功构建了长为8 825 bp的干扰载体PCB309-PLULT,并通过酶切测定为该目的载体;筛选出犬小孢子菌转化子的潮霉素最佳浓度为300 mg/L;用实时定量PCR方法对犬小孢子菌PQ-LRP基因干扰前后表达量进行鉴定:以干扰前PQ-LRP相对表达量1.0为标准,干扰后PQ-LRP相对表达量为0.39,干扰后下调61％.结论 干扰载体PCB309-PLULT可以明显抑制犬小孢子菌PQ-LRP基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨国玲	大连医科大学附属第一医院皮肤性病科	59	256	10.0	13.0
2	张芳芳	大连医科大学附属第一医院皮肤性病科	5	8	2.0	2.0
3	赵晓宣	大连医科大学附属第一医院皮肤性病科	2	6	1.0	2.0
4	刘金鹏	大连医科大学附属第一医院皮肤性病科	4	8	2.0	2.0
5	陈昕宜	大连医科大学附属第一医院皮肤性病科	1	6	1.0	1.0
6	刘建雯	大连医科大学附属第一医院皮肤性病科	1	6	1.0	1.0