甘蔗中性/碱性转化酶基因SoNIN1的克隆和表达分析

• 作者: 李杨瑞 杨丽涛 牛俊奇 王爱勤 黄静丽
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 甘蔗 中性/碱性转化酶 启动子 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 253-263
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.00253

摘要

中性/碱性转化酶(Alkaline/Neutral Invertasc)能不可逆地催化蔗糖分解为葡萄糖和果糖,在植物生长发育中起重要作用.本研究采用RT-PCR和RACE技术从甘蔗品种GT28心叶中克隆到甘蔗中性/碱性转化酶基因全长cDNA序列,基因命名为SoNIN1.该基因全长2289 bp (GenBank登录号为JX109944),开放阅读框为1812 bp,编码603个氨基酸,相对分子量为67.79 kD,等电点为6.41.具有中性/碱性转化酶保守结构域,N-端不含跨膜结构和信号肽.其编码氨基酸序列与玉米、水稻和黑麦草的亲缘关系较近,属于同一进化分支.利用染色体步移技术克隆到SoNIN1基因5’侧翼启动子序列,长度为1174 bp (GenBank登录号为KC854419).启动子序列含有多个CAAT-box和TATA-box等基本作用元件,参与分生组织特异性激活,参与干旱诱导的MYB结合位点,脱落酸、茉莉酸甲酯和赤霉素响应等作用元件.利用实时荧光定量PCR技术,在生理成熟期甘蔗茎、叶、花序和芽中均能检测到SoNIN1的表达,其表达量在叶中最高,芽中次之,而在+1节间最低.苗期根和叶中SoNIN1基因都受PEG和NaCl诱导表达.