皮肤感染性肉芽肿常见病原菌微孔板反向杂交检测法的研究

• 作者: 刘伟军 刘维达 姜海琴 孙建方 崔盘根 沈永年 王洪生 闫桢桢
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 肉芽肿 分枝杆菌感染 真菌感染 寡核苷酸反向杂交技术
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 633-636
• 页数: 4页
• 字数: 3713字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.09.007

摘要

目的 探讨微孔板反向分子杂交技术与PCR-ELISA相结合的“拟芯片”法检测和鉴定皮肤感染性肉芽肿常见病原菌的方法.方法 选取、设计真菌和分枝杆菌两对通用引物,及10种皮肤感染性肉芽肿常见的病原菌:结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、海鱼分枝杆菌、偶遇分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、申克孢子丝菌、卡氏枝孢霉、裴氏着色真菌、F.Monophora、白念珠菌的特异性探针;采用标准株验证通用引物、特异性探针并检测“拟芯片”法的敏感性、特异性;对19株临床分离株进行检测和鉴定.结果 两对通用引物均可扩增出对应的菌种基因序列,PCR产物经测序分析与预期相符;“拟芯片”法检测阴性标本吸光度为0.041±0.02,公式计算得临界值为0.101,在此基础上测得其敏感性为1×10～1×102个菌细胞/ml.各病原菌与相应的探针杂交,吸光度均＞ 0.101,为阳性;而与非对应的探针杂交,则吸光度＜0.101,为阴性,特异性高;对临床分离株的菌种鉴定准确率高.结论 “拟芯片”法可应用于皮肤感染性肉芽肿常见病原菌的实验室快速检测和鉴定.