VEGF特异2'-O-甲基化修饰siRNA抑制膀胱癌VEGF表达的实验研究

• 作者: 孙晓青 薛传锋 郑俊年 陈仁富
• 来源期刊: 国际泌尿系统杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱肿瘤 血管内皮生长因子 甲基化 RNA
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 856-860
• 页数: 5页
• 分类号: R737.14
• 字数: 4707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4416.2014.06.023

摘要

目的 研究VEGF特异性化学修饰RNA干扰对膀胱癌细胞增殖的影响.方法 针对VEGF构建siRNA表达载体PsilencerTM-VEGF-siRNA,为增加siRNA的稳定性,对VEGFsiRNA进行2'-O-甲基化化学修饰.通过Lipofectamine 2000将质粒转染到膀胱癌细胞,荧光显微镜观察siRNA转染效率,确定最佳时间点;分别采用Western Blot、RT-PCR检测VEGF蛋白含量及mRNA水平变化;MTT法检测细胞增殖率.结果 ①2'-O-甲基化化学修饰PsilencerTM-VEGF-siRNA表达载体构建成功;②脂质体与DNA最佳转染效率比例为:2μl∶1μg,48 h细胞存活状态最好;③48h转染效率在50％ ～ 60％,与对照组相比,转染PsilencerTM-VEGF-siRNA后蛋白及mRNA水平均下降;④MTT法检测显示:siRNA阳性对照组、VEGFsiRNA组与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 化学修饰的siRNA能够有效抑制膀胱癌中VEGF的表达,其稳定性增加,从而有效抑制膀胱癌细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓青	徐州医学院附属医院泌尿外科	99	359	9.0	14.0
2	陈仁富	徐州医学院附属医院泌尿外科	59	131	6.0	7.0
3	郑俊年	徐州医学院附属医院泌尿外科	3	2	1.0	1.0
4	薛传锋	徐州市第六人民医院泌尿外科	1	1	1.0	1.0