利用细菌表达dsRNA介导黄粉虫抗冻蛋白基因的RNA干扰

• 作者: 刘小宁 石萌 马纪
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 黄粉虫 抗冻蛋白基因 RNA干扰 双链RNA L4440载体
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 113-119
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

RNA 干扰（RNA interference，RNAi）是研究基因功能的一种重要工具。为了利用RNAi技术对黄粉虫抗冻蛋白（Antifreeze protein，AFP）基因的非抗冻功能进行验证，将黄粉虫抗冻蛋白基因Tmafp433的相应干扰片段构建至L4440干扰载体并转化大肠杆菌HT115（DE3）菌株，利用IPTG诱导表达特异的afp基因相应dsRNA，纯化后注射黄粉虫幼虫，通过实时荧光定量PCR检测afp基因在mRNA水平的变化。结果显示含有L4440-Tmafp重组质粒的HT115菌株可以表达干扰afp基因的dsRNA，命名为Tmafp-dsRNA。用Tmafp-dsRNA注射黄粉虫24 h后，Tmafps的表达受到显著抑制，相比对照下降了60.8%。本研究表明通过注射dsRNA可有效抑制黄粉虫afp基因的表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马纪	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室	80	657	14.0	23.0
2	刘小宁	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室	45	144	6.0	10.0
3	石萌	新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室	2	12	2.0	2.0