间接ELISA检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕

• 作者: 廉德平 王姗姗 马梦婷 马瑛 高庆华
• 来源期刊: 中国奶牛
• 学科: 农学
• 关键词: 奶牛 不孕 抗精子抗体 宫颈黏液 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2014,（16）
• 所属期刊栏目: 保健专辑
• 页码范围: 13-16
• 页数: 4页
• 分类号: S858.23
• 字数: 3475字
• 语种: 中文

摘要

为建立检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕的间接ELISA方法，以精子膜蛋白为包被抗原，进行奶牛宫颈黏液ASA的间接ELISA的优化试验。对27头ASA阳性不孕和29头ASA阳性可孕奶牛进行了间接ELISA检测标准的确定试验；对137头奶牛的宫颈黏液ASA免疫不孕进行间接ELISA临床检测。奶牛宫颈黏液ASA的间接ELISA优化条件为：抗原包被量为5μg/mL，宫颈黏液稀释度为1：5，宫颈黏液反应时间1h，二抗反应时间1.5h；奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕检测的判定标准为：当样品OD490nm值大于0.513时判定为ASA阳性免疫不孕，当样品OD490nm值小于0.410时可孕，当样品OD490nm值介于0.410~0.513时为ASA阳性疑似，重复试验的变异系数均小于10%。对临床137份宫颈黏液样品进行检测，发现13头ASA阳性免疫不孕奶牛都不能受孕，而98头阴性结果牛中有89头怀孕。结果表明，间接ELISA可以有效检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕。