稳定转染HBx基因的HepG2细胞株的建立及其对p53-p21途径的影响

• 作者: 曹鹏飞 柳永和 贺玉香
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒X基因 真核表达载体 HepG2细胞 p53-p21途径
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 380-383
• 分类号: R73-35
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2014.05.007

摘要

目的 将构建的乙型肝炎病毒X基因的真核表达载体稳定转染HepG2细胞株,并研究转染后对p53-p21途径的影响.方法 用基因转染的方法将已构建的载体pcDNA3.1-HBx转染入肝癌细胞HepG2中,G418筛选出稳定转染X基因的细胞株.细胞生长曲线、平板克隆形成实验检测转染后肝癌细胞的恶性表型,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,Western blot检测p53蛋白的表达,RT-PCR检测p21基因.结果 成功筛选出pcDNA3.1-HBx稳定转染的HepG2细胞株;细胞生长实验、平板克隆形成实验显示稳定转染乙型肝炎病毒X基因的肝癌细胞恶性表型增高;流式细胞仪结果显示,转染后的细胞株凋亡率增高,G1/G0期细胞减少,G2期细胞增多;Western blot和RT-PCR分别显示,转染株p53蛋白表达增高,且下调p21基因水平.结论 乙型肝炎病毒X蛋白可刺激肝癌细胞生长,稳定转染X基因的细胞株可能通过p53-p21途径增加肝癌细胞的恶性表型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柳永和	中南大学湘雅医学院检验系	21	84	6.0	8.0
2	贺玉香	中南大学湘雅医院肿瘤科	6	45	3.0	6.0