扩展青霉TS414脂肪酶的克隆与原核表达

• 作者: 周琼 唐良华 朱心强
• 来源期刊: 实验室科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 扩展青霉 脂肪酶 克隆
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 72-76
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 4925字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4305.2014.04.018

摘要

提取了扩展青霉Penicillium expansumTS414菌体的总RNA,并以反转录得到的cDNA为模板,成功扩增得到了脂肪酶基因;在此基础上,构建了重组表达载体pGEX-4T-1-PEL,并在大肠杆菌DH5α中实现了扩展青霉脂肪酶的表达;进一步采用低IPTG诱导浓度、低温、长时间的发酵策略等,使扩展青霉脂肪酶得以有活性的表达;同时,通过反复冻融细胞破碎法使其较好地从菌体细胞中分离出来,提取得到的酶液的活力达到0.49 U/mL.以上结果为后续脂肪酶分子进化等研究奠定了坚实的基础,亦可转化为高校或中学生物学实验教学的项目.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐良华	福建师范大学生命科学学院	37	308	11.0	15.0
2	周琼	福建师范大学生命科学学院	8	27	4.0	5.0