生物素-亲和素系统定向固定糖化酶的研究

• 作者: 侯红萍 张萍 王如福
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 糖化酶 定向固定化 生物素 亲和素 磁性琼脂糖微粒
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 应用技术
• 页码范围: 106-114
• 语种: 中文

摘要

以生物素-亲和素系统定向固定糖化酶,首先,通过正交试验确定生物素标记糖化酶的最佳条件是:质量浓度为4 mg/mL的酶液2mL、反应温度20℃、反应pH 4.6、搅拌时间2.5 h;其次,确定了亲和素-磁性琼脂糖微粒的最佳制备条件是:亲和素30μg/mg载体、反应时间20 min、pH 6.6;最后,确定了生物素-亲和素系统定向固定糖化酶的最佳条件是:生物素标记糖化酶液40 μL/mg载体、反应时间20 min、反应温度20℃、pH 6.1.此条件下固定化酶活力为1 629.7 U/g,活力回收率为50.3％,固定化酶相对活力为64.7％.对固定化糖化酶的酶学性质的研究表明,固定化酶的最适作用温度65℃,最适作用pH 5.1,米氏常数Km为2.28 mg/mL,较游离糖化酶的米氏常数Km(5.56 mol/L)小,说明其与底物的亲和力提高.固定化酶连续使用5次,酶活仍保持71.8％,固定化酶的半衰期为84d.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯红萍	山西农业大学食品科学与工程学院	76	686	15.0	21.0
2	王如福	山西农业大学食品科学与工程学院	84	517	13.0	19.0
3	张萍	山西农业大学食品科学与工程学院	3	29	3.0	3.0