菠萝凋萎相关病毒-2实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 何凡 刘志昕 李向宏 罗志文 胡加谊 范鸿雁
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 菠萝 菠萝凋萎病毒-2(PMWaV-2) TaqMan探针 实时荧光定量RT-PCR 检测
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 新方法
• 页码范围: 1257-1266
• 分类号: S668.3|S432
• 语种: 中文

摘要

菠萝凋萎相关病毒(Pineapple mealybug wilt associated virus-2,PMWaV-2)是引起的菠萝凋萎病(Mealybug wilt of pineapple,MWP)的重要病原.本研究中根据PMWaV-2外壳蛋白基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量RT-PCR检测方法.该方法能高灵敏检测出阳性样品,对阴性样品及空白对照均无荧光反应;灵敏度比普通PCR高100倍;重复性试验表明批内和批间变异系数均在1.85％以内,表明本方法是一种操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性较好的PMWaV-2定量检测方法.