疟原虫纯化新方法的研究

• 作者: 周利民 易国辉 薛伟玲 郭虹 黄宪希
• 来源期刊: 海南医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 去白细胞输血器 伯氏疟原虫 纯化
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 592-595,598
• 页数: 5页
• 分类号: R331
• 字数: 3575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20140321.003

摘要

目的:拟应用去白细胞输血器,建立一种快速简便纯化疟原虫的新方法,以去除宿主白细胞DNA干扰.方法:建立Pb ANKA株鼠疟模型;39只小鼠分为A组(新鲜虫血组,n=18)、B组(冻存虫血组,-80℃保存,n=16)及C组(正常对照组,n=5);应用去白细胞输血器对血样进行过滤纯化,观察比较过滤速度及血样处理(新鲜、冻存)对去除白细胞效果的影响;血细胞计数板和血涂片吉姆萨染色法计数各样本过滤前后白细胞、红细胞、原虫率并观察疟原虫形态和疟原虫密度.滤过后的血液提取DNA,PCR验证白细胞滤过效果.结果:经血细胞计数板计数,3组白细胞平均去除率比较,差异无统计学意义(P＞0.05);C组红细胞的回收率高于A组,差异具有统计学意义(P＜0.05);B组则仅见原虫.白细胞过滤后疟原虫形态及密度无明显改变.PCR鉴定PbGAPDH结果A、B组均为阳性,而小鼠GAPDH均为阴性.结论:建立了白细胞输血器一步法纯化疟原虫的新方法.该方法简便、快速、廉价,是进行疟原虫分子生物学、免疫学等方面的研究不可或缺的实用技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄宪希	海南医学院科学实验中心	9	25	4.0	4.0
2	周利民	海南医学院科学实验中心	21	27	3.0	4.0
3	易国辉	海南医学院科学实验中心	24	37	4.0	5.0
4	薛伟玲	海南医学院科学实验中心	8	21	3.0	4.0
5	郭虹	海南医学院科学实验中心	14	30	4.0	4.0