为了解2012年-2013年云南边境禽流感病毒 H5N1亚型血凝素(HA)基因变异及进化特征,在云南边境采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品1500份,经禽流感病毒 H5N1亚型特异性多重 RT-PCR 检测,选择代表性阳性样品,进行病毒 HA 基因扩增、纯化、克隆和测序,并与已知毒株和参考毒株序列进行序列比对及系统遗传进化分析。结果自1500份样品中检出 H5N1亚型阳性样品60份,60份阳性样品病毒 HA基因测序获得23种 HA 序列,可划分为2个不同进化分支(2.3.2,2.3.4),2.3.2进一步可划分为3个进化小分支(Ⅱ-1~Ⅱ-3),在23份代表性阳性样品中,17份样品属于进化小分支2.3.2Ⅱ-1,3份属于2.3.2Ⅱ-2,其余3份属于2.3.4;阳性样品中病毒 HA 裂解位点序列均具有高致病性禽流感病毒分子结构特征,HA受体结合位点、糖基化位点、表位关键性氨基酸位点及其他氨基酸位点存在变异,部分位点的变异具有分支或亚(小)分支特异性。2012年-2013年期间云南边境禽流感病毒 H5N1亚型间具有遗传差异,进化分支2.3.2Ⅱ-1成为当地流行的优势毒株。