斑马鱼Gfi1.1基因的克隆及其体外转录

• 作者: 关军 姜利军 尹琎 张义成 朱贤敏 赵磊
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: Gfi1.1基因 克隆 体外转录
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1818-1820,1812
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2014.10.004

摘要

目的:克隆斑马鱼Gfi1.1基因的全长cDNA,运用T7 RNA聚合酶对含有Gfi1.1基因的ORF区进行体外转录,在体外合成5端带有帽子结构的Gfi1.1 mRNA分子,为后续研究斑马鱼Gfi1.1基因的功能打下基础.方法:应用RT-PCR从斑马鱼组织中扩增出Gfi1.1cDNA片段,经回收纯化与pGM-T载体连接并转化感受态细菌DH-5α,通过蓝白筛选酶切鉴定阳性菌落,小量提取质粒,Nde Ⅰ限制性内切酶线性化pGM-T-Gfi1.1质粒,运用T7 RNA聚合酶对Gfi1.1基因进行体外转录及加帽.经凝胶电泳对目的片段进行鉴定.结果:RT-PCR扩增获得约1.2 kb的DNA片段,DNA序列分析的结果与GenBank上的序列(NM_001020776)一致,酶切线性化及体外转录加帽pGM-T-Gfi1.1,凝胶电泳鉴定RNA分子大小与预期完全一致.结论:成功克隆斑马鱼Gfi1.1基因并体外转录及加帽pGM-T-Gfi 1.1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵磊	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科	13	9	2.0	2.0
2	张义成	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科	70	143	7.0	9.0
3	关军	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科	9	11	2.0	3.0
4	朱贤敏	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科	5	2	1.0	1.0
5	姜利军	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科	11	21	2.0	4.0
6	尹琎	华中科技大学同济医学院附属同济医院血液科	9	8	2.0	2.0